造血干细胞(Hematopoietic stem cell,HSC)具备多谱系分化的能力,这使其能够持续产生所有成熟血细胞类型,包括红细胞、髓系细胞和淋巴细胞,从而维持整个机体的造血稳态。目前,常见的造血干细胞来源有四种:骨髓、外周血、脐带血及胎盘。随着诱导多能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells, iPSC)技术的不断进步,研究发现人类iPSC能够分化为造血干细胞(hiHSC),为多种血液相关疾病提供了新的治疗选择。
hiHSC的应用领域
hiHSC的应用主要体现在以下几个方面:
- 来源于患者的hiPSC衍生的hiHSC可以有效避免供体与宿主不匹配引发的移植物抗宿主病(Graft-versus-host disease, GVHD),这一问题是导致不完全匹配异基因移植患者出现严重病症和死亡的主要原因。
- 通过基因编辑的hiPSC衍生的hiHSC能够修复基因缺陷,从而治疗如骨髓衰竭综合征等疾病。
- 利用来自血液系统疾病患者的hiPSC衍生的hiHSC,可用于建立相应疾病模型,重现异常造血过程,进而推动特异性疗法的研发。
hiPSC来源的hiHSC分化方法
尊龙凯时已经建立了高效的hiPSC来源造血干细胞方法,具体分化流程如下:
- 首先,通过视黄醇乙酸酯等化合物促进中胚层的形成及血管内皮的分化;
- 随后调整VEGF信号通路以提高内皮向造血细胞转化的效率,最终获得高纯度的hiHSC。
关键技术路线如下:
- 经约2周的分化周期后,可获得CD34+CD45+高表达的hiHSC细胞,阳性率超过95%。
- 在分化约2周后,培养体系中会出现造血干细胞样的悬浮细胞。
- 第15天(DAY 15)悬浮细胞的流式细胞术检测结果显示,CD34+CD45+双阳细胞的比例高达95%以上,且CD90、CD44等标志物也有显著表达。
综上所述,尊龙凯时的hiPSC来源hiHSC展现出较高的质量,能够支持多种后续实验研究。项目研究表明,四个iPSC克隆均展现出良好的hiHSC分化能力,其中iPSC-3和iPSC-4衍生的hiHSC纯度较高。
hiHSC的优势与应用前景
理论上,hiPSC衍生的hiHSC与来自人脐带血的CD34+HSC功能相似,能够在免疫缺陷小鼠体内实现多谱系的人免疫细胞重建,进而提供有效的人源化免疫细胞小鼠模型,此模型可用于血液病相关药物筛选及评估其他药物对人类免疫系统的毒副作用。
与人脐带血来源的CD34+HSC相比,hiHSC的优势在于其来源的广泛性与可控性,因此,iPSC来源的造血干细胞具有广阔的应用前景,不仅推动基础研究的进展,还能有效应对血液疾病等医疗难题,并显著降低研究与治疗成本。