近年来,3D病理学技术因其能够捕捉肿瘤组织立体信息的独特优势,成为生物医疗研究的热门领域。传统的2D病理学方法依赖于薄切片图像,虽然在某些方面有其用处,但在肿瘤微环境分析时却存在明显局限性,无法全面展示肿瘤组织的三维结构。而3D病理技术则能够深入分析肿瘤的形态、免疫微环境及细胞分布等复杂特征,极大提高了诊断的准确性及临床应用的潜力。
3D病理成像技术,如光片显微镜和光学切片显微镜,可以对大体积组织样本进行扫描,并在不破坏组织结构的前提下提供细致的三维重建。这项技术使生物医疗研究者能够以全新的视角审视组织样本,提高了对病变区域的识别率和诊断的准确性。此外,3D无损成像技术使得宝贵的活检样本可以用于后续的分子检测,而不会损害样本完整性。同时,相较于传统方法,3D病理技术在简化实验室操作流程上也具有潜在的成本优势。
尽管3D病理技术有着显著的优越性,其应用与普及仍然面临诸多挑战。首先,数据处理和存储问题是一个亟待解决的核心问题。与传统的2D病理图像相比,3D病理图像的数据量巨大,高效处理和存储这些海量数据的能力至关重要。此外,3D病理的标注和训练也是一大难点。由于其具有更高的维度,传统的2D标注工具和方法不再适用,因此,开发适用于3D病理图像的标注和分析工具,尤其是能够实现自动化或半自动化的标注软件,已成为生物医疗领域的重要研究方向。
当前的3D成像技术包括破坏性和无损性3D显微技术。早期的破坏性3D显微技术依赖于串联切片技术,这要求消耗大量的人力和资金进行成像和3D重建。随着技术的发展,一些自动化的串联切片方法如刀刃扫描(KESM)和微光学切片断层扫描(MOST)被应用于商业化,但这些方法仍会破坏组织样本,并可能引入切片伪影。与此相对,无损3D显微技术主要应用共聚焦显微镜、多光子显微镜和光片显微镜。虽然共聚焦和多光子显微镜提供了良好的对比度和空间分辨率,但在应用中仍需克服一些挑战,例如其成像速度慢,适用于小样本或对精度要求较高的样本。
在过去十年中,光片显微镜,亦称选择性平面照明显微镜(SPIM),成为快速3D荧光显微镜检查透明标本的主要技术。光片显微镜通过细的激发光束垂直于探测轴照射样本,仅激发感兴趣的局部焦平面,从而高效获取3D数据集。光片显微镜的高效几何结构使其显著减少了光漂白和光损伤,因此在生物医疗研究中被视为“温和”的3D显微技术。
3D图像处理包括图像拼接、数据压缩及可视化处理。图像拼接是处理的第一步,需要利用软件将大量2D图像拼接成体积数据集。基于相机的3D显微技术,尤其是光片显微镜,采用16位sCMOS相机生成的每秒数据量可达800MB,为防止数据过大,可通过窗口化处理实现较高的“无损”压缩。最终,根据需求可形成不同的可视化效果,以便进行病理结果的分析判断。
值得注意的是,3D病理技术的应用不限于病理学本身,与基因组学、放射学等其他学科的结合将为精准医学的发展提供更为广泛的支持。通过跨学科的数据整合,3D病理将成为精准医疗和个性化治疗的重要工具。将3D病理图像与基因组数据及影像学数据进行联合分析,将为肿瘤的早期筛查、预后评估及治疗反应预测提供全面的数据支持。随着数据处理能力的提升及人工智能技术的融入,未来的病理诊断将更加智能化,推动生物医疗领域向全面数字化和高效化发展,**尊龙凯时**将引领这一前沿科技的发展。