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处理尊龙凯时培养的3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞

发布时间:2025-02-09   信息来源:尊龙凯时官方编辑

收到3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞后,应进行以下步骤以确保细胞的健康和后续实验的顺利进行。

处理尊龙凯时培养的3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞

细胞状态的初步检查

1)在收到细胞时,首先要检查细胞培养瓶的完整性,包括是否存在缝隙和裂痕。
2)通过显微镜观察细胞的生长状况,确认是否有细胞漂浮现象。

消毒与处理步骤

3)使用新洁尔灭对瓶口和瓶身进行消毒。
4)打开瓶口后,再次用新洁尔灭消毒瓶口(注意避免液体溢出),并用酒精灯对瓶口进行消毒。
5)将培养液转移至50ml的离心管或广口瓶中。如果细胞漂浮严重,可以进行离心处理,采用1000g离心5分钟。离心后,将上清液转移至另一个大离心管中,保留一点以便吹打细胞沉淀形成悬液,最终将细胞回收至原培养瓶中。如漂浮现象不严重,也可以进行简单离心。

细胞环境的适应与监测

6)在原培养瓶中保留一部分原装培养液,并加入新配制的培养基以增加总体积,例如补充4ml,让细胞能适应新环境。细胞在生长至70-80%时,需冻存大部分细胞,并进行少量的传代。

7)在细胞适应新环境24-48小时后,再次用显微镜观察细胞生长状态。若细胞贴壁良好、形态饱满且无明显漂浮或死亡现象,则可进行下一步操作。

细胞传代与冻存

8)进行细胞传代时,应先轻轻晃动培养瓶,使贴壁细胞松动,然后用吸管轻轻吹打细胞,形成均匀的细胞悬液。按照1:3或1:4的比例,将细胞悬液分装至新的培养瓶,并补充适量的新鲜培养基。

9)对于需要冻存的细胞,选择合适的冻存液(通常含有血清和DMSO),将细胞悬液与冻存液按一定比例混合后,装入冻存管中。遵循慢冻原则,先将冻存管放在4℃的冰箱中冷冻30分钟,再转移到-20℃的冰箱冷冻2小时,最后放入-80℃的冰箱或液氮中进行长期保存。

培养过程的注意事项

10)在整个细胞培养过程中,需定期更换培养基以维持细胞的营养供应和良好的生长环境。同时,应严格遵循无菌操作原则,以避免细胞污染。通过以上详细的处理步骤,3T6-Swissalbino小鼠胚胎成纤维细胞能够在实验室中稳定生长,从而为后续的科学研究奠定坚实的基础。在这一过程中,选择尊龙凯时的高质量细胞培养试剂,可以更好地支持细胞的生长和实验的顺利进行,为研究提供更可靠的保障。